技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES豬偽狂犬病毒gE蛋白阻斷ELISA抗體試劑盒
【獸用名稱】
通 用 名 豬偽狂犬病毒gE蛋白阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
商 品 名 無(wú)
英 文 名 Blocking ELISA Kit for Detection Pseudorabies Virus gE Antibody
漢語(yǔ)拼音 Zhu WeikuangquanbingbingdugBdanbai Zuduan ELISA Kangtijiance Shijihe
【主要組分與含量】
組分 | 含量 | 含量 | 含量 |
(1)抗原包被板 | 1板 | 2板 | 5板 |
(2)陽(yáng)性對(duì)照 | 1ml*1(藍(lán)蓋) | 1.5ml*1 | 2ml*1 |
(3)陰性對(duì)照 | 1ml*1(紅蓋) | 1.5ml*1 | 2ml*1 |
(4)酶標(biāo)記物 | 11ml*1(綠蓋) | 25ml*1 | 60ml*1 |
(5)樣品稀釋液 | 25ml*1(藍(lán)蓋) | 50ml*1 | 150ml*1 |
(6)20倍濃縮洗滌液 | 25ml*1 (黃蓋) | 50ml*1 | 150ml*1 |
(7)底物顯色液 | 11ml*1(棕蓋) | 20ml*1 | 50ml*1 |
(8)終止液 | 6ml*1 (紅蓋) | 11ml*1 | 26ml*1 |
(9)說(shuō)明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
【作用與用途】 用于檢測(cè)豬偽狂犬病毒抗體。
【注意事項(xiàng)】
(1)實(shí)驗(yàn)前,將試劑盒取出置25℃±3回溫,至少30分鐘,實(shí)驗(yàn)完成后置2~8℃保存。
(2)若試劑盒陰陽(yáng)性對(duì)照、酶標(biāo)記物出現(xiàn)少量懸浮物,屬正常現(xiàn)象。
(3)請(qǐng)?jiān)谠噭┖幸?guī)定的有效期內(nèi)使用;禁止非同批試劑盒混用。
(4)沒(méi)有用完的抗原包被板應(yīng)貯存在密封塑料袋內(nèi),置2~8℃存放。
(5)避免底物液暴露于強(qiáng)光,避免接觸氧化劑。
(6)濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。
(7)嚴(yán)格按照操作程序,仔細(xì)的吸液、計(jì)時(shí),充分洗滌,對(duì)于獲得精確的結(jié)果是非常必要的。
(8)使用樣品稀釋板將所有待檢血清稀釋好,再進(jìn)行檢測(cè)。
【用法與判定】
1 用法
1.1 樣品準(zhǔn)備 取動(dòng)物全血,4000r/min離心10分鐘,收集上清。或采集血液,待凝固后自然析出血清。血清清亮,無(wú)溶血。
1.2 樣品稀釋 在樣品稀釋板中,用樣品稀釋液按1:1的比例稀釋待檢血清(例如:120μl樣品稀釋液中加120μl待檢血清);陰性、陽(yáng)性對(duì)照不稀釋,直接使用。
1.3 洗滌液配制20倍濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫(20~25℃),然后用蒸餾水或純水作20倍稀釋。
1.4 操作步驟
1.4.1 取抗原包被板(根據(jù)樣本多少,可拆開(kāi)分次使用),每孔加入稀釋好的樣本100μl;另外設(shè)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各2孔,100μl/孔。置37℃孵育60分鐘。
1.4.2 棄去板中液體,每孔加入稀釋好的洗滌液300µl,棄掉孔中洗滌液,重復(fù)洗滌共計(jì)洗板5次,拍干。
1.4.3 每孔加入100μl酶結(jié)合物,輕微振蕩混勻。置37℃下孵育20分鐘。
1.4.4 棄去板中液體,洗滌5次,方法同1.4.2。
1.4.5 每孔加底物顯色液100µl,室溫(20~25℃)避光顯色10分鐘。
1.4.6 每孔加終止液50µl。15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定并記錄各孔在630nm波長(zhǎng)處的吸光度(OD)值。
2 判定
2.1 成立條件 試驗(yàn)成立條件是陰性對(duì)照的OD630nm平均值≥0.6,陽(yáng)性對(duì)照的OD630nm平均值≤0.5。
2.2 判定標(biāo)準(zhǔn) S為樣品孔OD630nm值,N為陰性對(duì)照OD630nm平均值。如果S/N≤0.6判為陽(yáng)性。如果0.6<S/N≤0.7判為可疑。如果S/N>0.7判為陰性。
【規(guī)格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒
【貯藏與有效期】 2~8℃保存,有效期為12個(gè)月。
僅供科研使用
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